rna干扰的分子机制 一起来看看

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(资料图片仅供参考)

1、RNA干扰(RNA interference,RNAi)是通过抑制转录后水平的基因表达而诱导功能缺失表型的有力工具。

2、由dsRNA(double-stranded RNA)引发的特定基因表达受抑制现象称为RNA干扰作用。

3、dsRNA(double-stranded RNA)可以介导基因沉默作用,以dsRNA为基点研究基因沉默的分子机制成为热点。

4、dsRNA指的是大于30个碱基对的RNA分子。

5、哺乳动物细胞有至少2条路径竞争双链RNA(dsRNA),其一是特异性路径:特殊dsRNA的序列用于RNAi,起始阶段dsRNA被切成siRNA(small interfering RNA 或short interfering RNAs)。

6、siRNA是RNA干扰作用赖以发生的重要中间效应分子,能提供一定的信息,允许一个特定的mRNA被降解。

7、siRNA正义链与反义链各有21个碱基,其中19个碱基配对,再每条链的3’端都有2个不配对的碱基。

8、 另一条是非特异性路径:只要有长的dsRNA的存在它可以降解所有的RNA,抑制所有蛋白质的合成。

9、长的dsRNA激活蛋白激酶PKR,激活的PKR通过一系列的磷酸化关闭翻译起始因子,导致翻译抑制。

10、也可以通过激活2’-5’AS 合成一个分子激活RNase L,导致非特异的RNA降解。

11、 关于特异性的RNA作用机制模型,包括起始阶段和效应阶段。

12、起始阶段dsRNA在Dicer酶(RNaseIII家族中特异识别双链RNA的一员,属内切核酸酶)的作用下加工裂解21-23核甘酸长的小分子干扰RNA片断(siRNA)。

13、Dicer含有解旋酶活性以及dsRNA结合域和PAZ结构。

14、 在RNAi 的效应阶段,siRNA双链结构解旋并形成有活性的蛋白/RNA复合物(RNA-induced silencing complex or RISC),在siRNA 解双链即RISC激活过程需一个ATP。

15、由RISC中siRNA反义链与mRNA互补区域结合,随后切割mRNA从而达到在RNA水平干扰基因表达。

16、RISC由多种蛋白成分组成,包括核酸酶,解旋酶和同源RNA链搜索活性等。

17、细胞由于进化的机理,有一套降解双链RNA的酶系统(抗病毒感染)。

18、RNAi就是利用这一系统,人工引入一段和目标RNA互补的序列,这样,在细胞内形成双链RNA,诱发降解机制。

19、使目标RNA降解,无法被进一步翻译了。

20、RNA干扰(RNAi)指的是,将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相应的基因沉默的现象。

21、【Abstract】 RNA interference(RNAi) in diverse organisms reveals the same highly conserved mechanism with an ancient origin.RNAi is the mode of sequence-specific post-transcriptional gene silencing in animals and plants initiated by homologous double-stranded RNA(dsRNA). discovery of RNAi and the molecular mechanism will help us apply it to study the gene function and exploit the gene drug. 【Key words】 RNA interference(RNAi) small interfering RNA(siRNA) double-stranded RNA(dsRNA) RNA-induced silencing complex(RISC) Argonaute pol III。

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